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LS-Cui新蟲 (初入文壇)
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[交流]
做快速核酸檢測需要知道的那些技術(shù)(七) 已有1人參與
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繼續(xù)分享重組酶和聚合酶等溫檢測過程中需要注意的問題以及相關(guān)注意事項。 1. 重組酶和聚合酶等溫檢測里,引物的3'端穩(wěn)定性對擴(kuò)增影響大嗎? 影響不是太大,最好按照設(shè)計原則里來進(jìn)行設(shè)計。 2. 那么引物3'端穩(wěn)定性好的是不是更有利于引物與模板的結(jié)合? 這個理論上是的。 所以重組酶和聚合酶等溫檢測里引物的3'端最好要有G或C。 3. 熒光探針的3'端阻斷會選擇用什么來做阻斷呢? 一般的阻斷都可以,常用的比如C3-Spacer等。 4. 核酸檢測的試紙條是什么樣的,識別什么基團(tuán)? 外觀和普通試紙條沒區(qū)別。 可以識別FAM和生物素。 5. 熒光法重組酶和聚合酶等溫檢測的平臺峰值的熒光強(qiáng)度大小,是不是與擴(kuò)增的目的產(chǎn)物數(shù)量多少有關(guān)? 不是,擴(kuò)增的數(shù)量是跟起峰的時間有關(guān)。熒光強(qiáng)度大小跟探針的修飾有很大關(guān)系。 |
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