 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 813 | 回復(fù): 0 | |||
LS-Cui新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[交流]
做快速核酸檢測(cè)需要知道的那些技術(shù)（四）
|
|
今天繼續(xù)分享關(guān)于重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)的擴(kuò)增產(chǎn)物及實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的事項(xiàng)等。 1、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)的擴(kuò)增產(chǎn)物是否可以進(jìn)行測(cè)序? 可以�？梢允褂弥亟M酶和聚合酶等溫檢測(cè)基礎(chǔ)試劑盒，擴(kuò)增產(chǎn)物可以經(jīng)純化后進(jìn)行直接測(cè)序。 不可以。可以使用重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)熒光試劑盒，其擴(kuò)增產(chǎn)物不可以進(jìn)行測(cè)序，這是因?yàn)樵跓晒庠噭┖兄惺褂昧撕怂嵬馇忻�，�?huì)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行消化。 2、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物跑膠前需要純化嗎？ 需要。重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)反應(yīng)體系里的成分會(huì)干擾正常的瓊脂糖凝膠電泳，如果不進(jìn)行反應(yīng)產(chǎn)物回收，跑出來(lái)的可能是彌散條帶。 建議用Tris飽和酚和氯仿按1：1的比例進(jìn)行混合，或可以采用PCR產(chǎn)物純化試劑盒。 3、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)是否可以采用染料(染色劑)進(jìn)行檢測(cè)？ 可以。不過(guò)，就像 PCR一樣，這種染料通�？梢越Y(jié)合到任何雙鏈 DNA上，因此引物干擾會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性信號(hào)。引物干擾在較低的溫度下會(huì)更嚴(yán)重一些，因此，不推薦將插入性染料用于這類試劑盒。 4、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)里的酶量可以調(diào)整嗎？ 如果是成品試劑盒，最好不要調(diào)整，重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)反應(yīng)體系中的酶量是測(cè)試的最佳的濃度，一般情況下是不進(jìn)行調(diào)整的。 5、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)的反應(yīng)緩沖液可以多加或少加嗎？ 如果是成品試劑盒的話，反應(yīng)緩沖液的量是配套體系最佳的量，最好不要多加或少加。 6、重組酶和聚合酶等溫檢測(cè)反應(yīng)時(shí)需要反應(yīng)4分鐘之后拿出來(lái)混勻嗎？ 需要。如果擴(kuò)增的模板濃度很高，可以省略該步驟，一般情況下，反應(yīng)4分鐘之后需拿出來(lái)進(jìn)行混勻離心，使反應(yīng)組分充分混合，達(dá)到最佳的效果。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有259人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 LS-Cui 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 月色c 2026-03-05 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +4 | berdmond 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] A區(qū)一本交叉課題組，低分調(diào)劑，招收機(jī)械電子信息通信等交叉方向 +16 | lisimayy 2026-03-04 | 24/1200 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工求調(diào)劑！ +5 | 化工考生111 2026-03-04 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +3 | Trying] 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +6 | 啊歐歐歐 2026-03-03 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料277分求調(diào)劑 +9 | 飯飯星球 2026-03-04 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料085601一志愿哈工大317 +3 | 壓迫感行 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)工程求調(diào)劑 +10 | 化工人999 2026-03-04 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0855機(jī)械工程324求調(diào)劑 +3 | 鄭SK 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩材料275調(diào)劑 +9 | 路三三 2026-03-03 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 本科太原理工采礦工程，求調(diào)劑 +3 | onlx 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601 材料305分求助 +4 | 泡泡郵件 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 331求調(diào)劑 +3 | zzZ&zZ 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | BrightLL 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研]
材料工程專碩283求調(diào)劑
 5+8
|
，�。� 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑一志愿東北林業(yè)大學(xué)材料與化工英二數(shù)二 +5 | 蟲(chóng)蟲(chóng)蟲(chóng)蟲(chóng)蟲(chóng)7 2026-03-01 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑285 +11 | 呂仔龍 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 化工299分求調(diào)劑 一志愿985落榜 +5 | 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856材料求調(diào)劑 +4 | 麻辣魷魚(yú) 2026-02-28 | 4/200 |
|