 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1304 | 回復: 4 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者gxiaoyao將贈送您 25 個金幣 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 博學EPI ，點擊這里進行查看 | |||
[求助]
2000bp的堿基缺失后還能回復突變嗎?
|
|||
|
最近遇到了一怪事: 敲除了某細菌的一個ORF菌落PCR檢測和DNA測序證明是正確的敲除菌株，當將正確的單菌落接至LB中培養(yǎng)后進行菌液PCR檢測發(fā)現(xiàn)有微弱的條帶和陽對(出發(fā)菌株)一樣。開始懷疑是敲除菌株里混有未敲除菌株，所以對剛檢測過的菌液再進行平板劃線、挑單。再進行菌落PCR檢測，發(fā)現(xiàn)了好多單菌落都P出了微弱的條帶和陽對一樣，挑沒有出現(xiàn)和陽對一樣DNA條帶的單菌落再接至LB中培養(yǎng)，再進行菌液PCR檢測，又P出了微弱的DNA條帶和陽對一樣! 如果說是敲除菌株中混有沒敲除的菌株，那在我反復分單的情況下肯定會得到純的敲除菌株。然而事實是我連續(xù)分單了2次后分別進行菌落PCR和菌液PCR檢測，菌落PCR檢測是正確的敲除菌株，相同的菌落在LB液體里生長后在菌液PCR檢測就會發(fā)現(xiàn)它不完全是正確的敲除菌株。 你們有碰到相似情況嗎?我可以將這種現(xiàn)象歸結(jié)為敲除菌株的回復突變嗎?我知道一兩個堿基突變后可以發(fā)生回復突變，2000bp的堿基缺失后還能回復突變嗎? 之前有看到蟲友發(fā)了類似的帖子，不知道現(xiàn)在解決了嗎，歡迎回帖啊  |
回復此樓» 猜你喜歡
085701環(huán)境工程 求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復
-
264求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復
-
085600 材料與化工 298
已經(jīng)有8人回復
-
266求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
-
0854總分272
已經(jīng)有6人回復
-
EST拒稿重投
已經(jīng)有3人回復
-
歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計算機、人工智能等專業(yè)的同學報考
已經(jīng)有11人回復
-
0703化學學碩 288分
已經(jīng)有4人回復
-
接收調(diào)劑
已經(jīng)有23人回復
-
化學 0703求調(diào)劑 總分293 一志愿211
已經(jīng)有3人回復
slcat
新蟲 (著名寫手)
- 博學EPI: 1
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 25705.2
- 散金: 500
- 紅花: 1
- 帖子: 2594
- 在線: 12.1小時
- 蟲號: 1741741
- 注冊: 2012-04-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wolfghost: 金幣+2, 積極應(yīng)助獎勵~ 2021-05-12 17:28:27
gxiaoyao(qfw_68代發(fā)): 金幣+5 2021-05-25 15:42:27
qfw_68: 博學EPI+1, 積極應(yīng)助獎勵！ 2021-05-25 15:42:39
wolfghost: 金幣+2, 積極應(yīng)助獎勵~ 2021-05-12 17:28:27
gxiaoyao(qfw_68代發(fā)): 金幣+5 2021-05-25 15:42:27
qfw_68: 博學EPI+1, 積極應(yīng)助獎勵！ 2021-05-25 15:42:39
|
有沒有可能是非特異性條帶？可以重新設(shè)計被敲除片段內(nèi)部的引物進行PCR驗證，或者把該條帶回收測序驗證 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-05-10 20:31:37
3樓2021-05-12 15:48:49
夢の國度
捐助貴賓 (文學泰斗)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3337.1
- 散金: 177
- 紅花: 2
- 帖子: 67310
- 在線: 168.3小時
- 蟲號: 977074
- 注冊: 2010-03-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 數(shù)論
4樓2021-05-24 12:36:56
Tosendanin
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 979
- 帖子: 391
- 在線: 16.2小時
- 蟲號: 23276697
- 注冊: 2020-07-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學
5樓2023-05-31 23:13:16
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 gxiaoyao 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +7 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計算機、人工智能等專業(yè)的同學報考 +8 | pin8023 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 復試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +6 | 好運連綿不絕 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程專碩307求調(diào)劑 +3 | ccc! 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
材料325求調(diào)劑
 30+3
|
mariusuki 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +7 | axyz3 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +4 | 2103240126 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料調(diào)劑 +5 | 沿岸有貝殼OUC 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑285 +11 | 呂仔龍 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +7 | 明遠求學 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +8 | yang婷 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +3 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265分求調(diào)劑不調(diào)專業(yè)和學校有行學上就 +6 | 禮堂丁真258 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[基金申請]
 本子寫完了，給DS兄弟看了，得了92分
+3
|
Doma 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
一志愿中南大學理學化學
+4
|
15779376950 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291分工科求調(diào)劑 +9 | science餓餓 2026-03-01 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 亭亭亭01 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[論文投稿]
求助coordination chemistry reviews 的寫作模板
10+3
|
ljplijiapeng 2026-02-27 | 4/200 |
|