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藥化小菜雞新蟲 (初入文壇)
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[求助]
藥動學(xué)求助
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標(biāo)曲濃度點(diǎn)的確定： 大鼠給藥方案是 將規(guī)格為1mg/ml的藥物，根據(jù)大鼠體重按照5ml/kg進(jìn)行尾靜脈注射給藥（一共三種藥物A，B C），理想狀態(tài)下，一只大鼠最重約300g,給藥量最大=0.3kg*5ml*1mg/ml=1.5mg,大鼠體內(nèi)全部血液視為15ml,即最高血藥濃度為1.5mg/15ml=0.1mg/ml。 根據(jù)藥物非臨床藥代動力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則，標(biāo)曲的線性范圍應(yīng)該包括5個半衰期濃度，故標(biāo)曲濃度設(shè)置如下： 0.2mg/ml（200ppm）、0.1mg/ml（100ppm）、0.05 mg/ml（50ppm）、 0.02 mg/ml（20ppm）、0.01 mg/ml（10ppm）、0.005 mg/ml（5ppm）、0.002 mg/ml（2ppm）、0.001 mg/ml（1ppm）. 濃度太大，儀器（安捷倫6460）不敢進(jìn)這么大的濃度，因此需要稀釋標(biāo)曲倍數(shù)： 稀釋標(biāo)曲100倍： 2ppm, 1ppm, 0.5ppm, 0.2ppm, 0.1ppm, 0.05ppm, 0.02ppm, 0.01ppm 那么血樣我們需要怎么處理才能滿足稀釋100倍呢？ 方案一：取10ul樣本血樣，加空白血990ul，得稀釋100倍后的血樣，然后取稀釋后的血樣100ul, 加入A、B、C藥物對照品溶液各10ul，加入內(nèi)標(biāo)IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白，渦旋3min，再12000r/min 高速離心10min，取上清液進(jìn)樣。 如果按照上述方案進(jìn)行，樣本血樣加空白血稀釋了100倍之后，再加乙腈沉淀蛋白（此處稀釋了4倍），那么樣本的稀釋倍數(shù)是不是變成了400倍？ 方案二： 取10ul樣本血樣，加空白血240ul，得稀釋25倍的血樣，然后取上述所得血樣100ul, 加入A、B、C藥物對照品溶液各10ul，加入內(nèi)標(biāo)IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白，渦旋3min，再12000r/min 高速離心10min，取上清液進(jìn)樣。 如果按照方案二，是血樣用空白血稀釋了25倍，前處理乙腈稀釋了4倍，共100倍 請問老師，這兩種稀釋方案哪種可行嗎？如果都不可行，求老師指導(dǎo)！謝謝老師 |
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panyuanfu
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你這個劑量我估計血藥濃度頂多0.03mg/ml，稀釋的話不會用血漿去稀釋的，直接十倍沉淀，再用進(jìn)樣溶液稀釋，滿足靈敏度前提下稀釋越多越好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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藥化小菜雞2樓2021-05-03 11:07:02
panyuanfu
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5樓2021-05-03 11:11:27
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