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abcjlm銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
amp抗性菌發(fā)酵
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| amp抗性菌發(fā)酵過程中會產(chǎn)生內(nèi)酰胺酶,是抗生素降解,會使發(fā)酵液中抗生素濃度降低,不含質(zhì)粒的菌株瘋長或拷貝數(shù)降低,導(dǎo)致重組蛋白濃度降低,請問有什么好的解決辦法嗎 |
新蟲 (小有名氣)
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由于amp是β內(nèi)酰胺類抗生素,其作用機理跟kana等抗生素不一樣,它的內(nèi)酰胺環(huán)會被質(zhì)粒amp抗性基因表達的酶切割斷裂,從而水解amp,使帶抗性基因的細胞得以存活。對于搖瓶低密度表達,amp的量足夠,所以還好。但要是上罐發(fā)酵,菌體密度大,加入的amp被水解消耗,可能導(dǎo)致質(zhì)粒丟失、污染等情況,雖然可以通過補加amp的措施補救,但由于不好監(jiān)控,且對細胞生長狀態(tài)以及不同批次的重復(fù)性等等都會產(chǎn)生影響,所以不推薦這么干。最方便的就是改質(zhì)粒抗性。另外,如果是制藥,中國藥典是明確規(guī)定發(fā)酵不得使用內(nèi)酰胺類抗生素的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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