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湛西新蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)菌基因敲除的接合篩選 已有1人參與
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我在做一個(gè)弧菌的基因敲除，使用的是利用自殺質(zhì)粒的雙交換同源重組方法。我將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌和弧菌涂布到雙抗板(弧菌抗氨芐，質(zhì)粒上有卡那的抗性基因)上后，取長(zhǎng)出來的菌做pcr，引物是融合同源臂兩端的引物，理論上條帶應(yīng)該有兩條，一條是融合同源臂的，一條是上下同源臂間夾著待敲除基因的。但現(xiàn)在只有融合同源臂的條帶，我想請(qǐng)問下大家這是怎么回事，是因?yàn)樽詺①|(zhì)粒選的不好導(dǎo)致它復(fù)制了嗎？急，請(qǐng)求大家的幫助。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2021-05-11 16:06:37
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3樓2021-05-15 11:28:33
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4樓2021-09-04 10:45:56
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