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求助!!!! 流式細(xì)胞術(shù)檢測綠豆芽細(xì)胞的周期,應(yīng)該怎么處理細(xì)胞?
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求助!!!! 流式細(xì)胞術(shù)檢測綠豆芽細(xì)胞的周期,應(yīng)該怎么處理細(xì)胞?有沒有大佬推薦一下這類文獻(xiàn) 我在實(shí)驗(yàn)書上看到的步驟:1.將萵苣種子置于光照培養(yǎng)箱中,黑暗條件下25℃培養(yǎng),待根尖長到1cm左右 2.切取根尖2m左右,置于含有600 Clenin核緩沖液的培養(yǎng)血中,其中含有 3.冰浴下,用干凈刀片將根尖切鮮碎,傾斜培養(yǎng)皿使細(xì)胞核緩慢流人緩沖液中。 4. 所得細(xì)胞核懸液用孔徑30 μm的細(xì)胞篩網(wǎng)過速2次,收集濾液(450pL)于離心管中,離心( 100 r/min), 5min。棄上清液并加人200 uL Galbraith核緩沖液,輕輕吹勻。 5.用PI染色5-8min后,用流式細(xì)胞儀分析。每一個樣品至少分析 10000個細(xì)胞核。 6.上機(jī)檢測。 我基本上是按照這個步驟來的,但是只一個峰。 |
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