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芒果草莓96新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助結(jié)晶紫染色法測定細(xì)菌生物膜具體步驟 已有1人參與
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剛剛接觸細(xì)菌生物膜的新手求助具體步驟(菌株是蠟樣芽胞桿菌): 1 100微升培養(yǎng)液接種10微升菌液,37℃靜置培養(yǎng)24h; 2 吸出培養(yǎng)液,加入200微升PBS洗滌3次(每次都會吸出渾濁的物質(zhì),是生物膜嗎?怎樣才能避免破壞膜呢?); 3 100微升甲醇固定15min,吸出甲醇; 4 100微升結(jié)晶紫溶液染色(結(jié)晶紫溶液到底應(yīng)該用多大的濃度,有1%和0.1%的濃度,該選哪個?染色要多久?有文獻(xiàn)說5min還有說15min。) 5 100微升95%乙醇脫色(脫色時間要多久?) 6 測OD值(到底測590nm還是595nm還是540nm?) 測OD590時,酶標(biāo)儀結(jié)果還出了星號咋回事,新手剛剛接觸生物膜,啥也不懂,求大神指教! |
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