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victor_u新蟲 (小有名氣)
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[交流]
關(guān)于蛋白質(zhì)的分離純化 已有3人參與
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簡介：一枚生命科學(xué)行業(yè)的技術(shù)控，共同學(xué)習(xí)，歡迎補(bǔ)充。 蛋白質(zhì)的分離純化是生物化學(xué)技術(shù)中的重要內(nèi)容，在科研和生產(chǎn)中都有重要作用。蛋白質(zhì)純化的流程大致包括選材及預(yù)處理、細(xì)胞破碎及抽提、初步提取和精制純化等部分，根據(jù)具體的純化目的和要求可以有所不同。 選材的主要原則是原料易得，蛋白含量高，最好便于純化。蛋白質(zhì)的主要來源包括動物、植物和微生物。由于種屬差異及培養(yǎng)條件和時間的差別，其蛋白含量可相差很大，提取難度也完全不同。 一般植物細(xì)胞含纖維素，堅(jiān)韌，不易破碎，且多含酚類物質(zhì)，易氧化產(chǎn)生有色物質(zhì)，難以除去。其液泡中又常含有酸性代謝物，會改變?nèi)芤旱膒H。微生物因?yàn)槿菀着囵B(yǎng)而較為常用，但也需要破碎細(xì)胞壁。動物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，相對容易處理，但往往成本較高。 選定材料之后，一般都需要進(jìn)行簡單的預(yù)處理，快速去除不需要的部分，以利于蛋白質(zhì)的提取操作。常見的預(yù)處理包括植物種子去殼、脫脂，葉片清洗、去除干枯壞死組織；動物組織清洗血污，去除皮毛、脂肪、神經(jīng)、血管；微生物發(fā)酵液細(xì)胞分離和絮凝等。 如目的蛋白在細(xì)胞內(nèi)，需要進(jìn)行細(xì)胞破碎，使蛋白釋放出來。動物細(xì)胞可用細(xì)胞破碎機(jī)、勻漿器、、超聲波、丙酮干粉等方法破碎。植物可用石英砂研磨或纖維素酶處理。微生物的細(xì)胞壁是一個大分子，破碎較難。有超聲振蕩、研磨、高壓、溶菌酶、細(xì)胞自溶等方法。 【互動回帖吧】 關(guān)于蛋白質(zhì)的分離純化，大家有什么建議和心得呢？歡迎分享過來~ |
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victor_u
新蟲 (小有名氣)
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3樓2021-03-15 08:59:03
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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細(xì)胞破碎現(xiàn)在都用高壓細(xì)胞破碎機(jī)了，效果比其他方法好很多，完全可以替代超聲，省時省力，推薦大家使用 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2021-03-13 23:23:34
Anpanman77
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- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
4樓2021-03-15 10:40:15
5樓2021-07-23 14:24:14
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