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coralpt新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助！為何提取DNA梯度稀釋后Ct值無差別 已有1人參與
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| 各位小伙伴，本人提取放線菌DNA10倍梯度稀釋準備做標準曲線，稀釋5個梯度跑PCR發(fā)現(xiàn)各梯度間Ct值無明顯變化，甚至出現(xiàn)稀釋后Ct值比未稀釋模板還小的情況。另外Ct數(shù)值非常小，大概是10左右，有的還達到6,7這樣的數(shù)值。融解曲線是單峰，體系是20ul里加入2ul模板，正反引物各0.8ul，6.4ul dd水及10ul SYBR green。未稀釋的DNA濃度為20ng/ul。稀釋過程是10ul加入90ul TE緩沖液。請大家?guī)兔Ψ治隹赡茉颍粍俑屑ぃ? |
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2樓2021-03-08 16:57:03
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