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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

[求助] ELISA測細(xì)胞上清液,怎么確定是藥物作用每個細(xì)胞分泌變化引起的炎癥因子變化?

藥物刺激后,實驗組和對照組細(xì)胞數(shù)量有很大差異,所以這樣測出來的因子怎么排除是通過影響細(xì)胞增殖引起的炎癥因子變化?確保是藥物直接作用細(xì)胞?

目前想到的是:1通過不加血清或者低血清抑制增殖,從而保證細(xì)胞數(shù)量一致,但這樣會不會影響細(xì)胞狀態(tài),分泌減少,2取了上清液以后再計算細(xì)胞數(shù)量,用上清液因子量/細(xì)胞數(shù)量,再比較,

不知各位大神有什么好辦法,或者我想的辦法可行嗎?

@gyesang 發(fā)自小木蟲Android客戶端
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小仙女13

木蟲 (著名寫手)

我們這邊做的都是對照組與實驗組一起取上清做elisa

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2樓2020-12-22 21:58:29
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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

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2樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 21:58:29
我們這邊做的都是對照組與實驗組一起取上清做elisa

想繼續(xù)咨詢您2個問題,1、你們?nèi)∩锨逡簳r,實驗組對照組細(xì)胞數(shù)量差異大嗎?2還會做RT-PCR
之類的進(jìn)行輔證確實在細(xì)胞內(nèi)蛋白就有差異了?

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3樓2020-12-22 22:09:20
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小仙女13

木蟲 (著名寫手)

引用回帖:
3樓: Originally posted by 世界美樂 at 2020-12-22 22:09:20
想繼續(xù)咨詢您2個問題,1、你們?nèi)∩锨逡簳r,實驗組對照組細(xì)胞數(shù)量差異大嗎?2還會做RT-PCR
之類的進(jìn)行輔證確實在細(xì)胞內(nèi)蛋白就有差異了?
...

取了上清你是怎么確定細(xì)胞數(shù)變化很大呢?我們只取上清測定因子釋放的量。
也做過你說的pcr,只是要求不同吧不是一個實驗

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4樓2020-12-22 23:01:42
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小仙女13

木蟲 (著名寫手)

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4樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:01:42
取了上清你是怎么確定細(xì)胞數(shù)變化很大呢?我們只取上清測定因子釋放的量。
也做過你說的pcr,只是要求不同吧不是一個實驗
...

你都是一起種的板子,細(xì)胞數(shù)為什么會有差異?如果用藥物處理導(dǎo)致差異不也是合理的?

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5樓2020-12-22 23:03:58
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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

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5樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起種的板子,細(xì)胞數(shù)為什么會有差異?如果用藥物處理導(dǎo)致差異不也是合理的?
...

我做了細(xì)胞活性實驗,加了藥和不加藥的相差30%多,ELISA測了做了預(yù)實驗,因子確實有差異的,我想知道的是除了藥物抑制細(xì)胞數(shù)量導(dǎo)致因子分泌減少外,看有沒有可能是因為藥物作用直接降低細(xì)胞本身的因子分泌,

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6樓2020-12-22 23:18:35
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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

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5樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起種的板子,細(xì)胞數(shù)為什么會有差異?如果用藥物處理導(dǎo)致差異不也是合理的?
...

細(xì)胞鋪板時的數(shù)據(jù)都是一樣的

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7樓2020-12-22 23:19:41
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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

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5樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起種的板子,細(xì)胞數(shù)為什么會有差異?如果用藥物處理導(dǎo)致差異不也是合理的?
...

細(xì)胞鋪板時的數(shù)量都是一樣的

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8樓2020-12-22 23:20:07
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小仙女13

木蟲 (著名寫手)

引用回帖:
6樓: Originally posted by 世界美樂 at 2020-12-22 23:18:35
我做了細(xì)胞活性實驗,加了藥和不加藥的相差30%多,ELISA測了做了預(yù)實驗,因子確實有差異的,我想知道的是除了藥物抑制細(xì)胞數(shù)量導(dǎo)致因子分泌減少外,看有沒有可能是因為藥物作用直接降低細(xì)胞本身的因子分泌,
...

沒毛病吧?這不就是實驗組對照組的區(qū)別嗎?

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9樓2020-12-23 22:06:30
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世界美樂

新蟲 (正式寫手)

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9樓: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-23 22:06:30
沒毛病吧?這不就是實驗組對照組的區(qū)別嗎?
...

舉個例子,某藥物一方面阻礙細(xì)胞繁殖,具有一定細(xì)胞抑制性這是有害的,同時也發(fā)現(xiàn)細(xì)胞分泌的胞外蛋白減少,這時就不好解釋是因為他的毒性抑制了細(xì)胞繁殖,減少了細(xì)胞數(shù)量從而導(dǎo)致的炎癥因子減少,還是本身就降低了細(xì)胞的分泌水平,

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10樓2020-12-24 00:00:48
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