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| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者quejing26將贈送您 100 個金幣 | ||
[求助]
反向pcr
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求助大佬們一個關(guān)于反向pcr的問題。 我們主要是獲得轉(zhuǎn)基因片段的側(cè)翼序列，反向pcr的功能就是能夠根據(jù)已知的片段，去擴(kuò)增旁邊的未知片段。步驟是酶切，純化，T4連接，pcr（兩輪）。之前我們一直做的很好，今年6月份開始pcr沒有條帶。我用相同的方法給別人做（材料，引物不同）可以，說明我們實驗室的試劑，我的手法是沒有問題的，但是自己的材料怎么也做不出來，我一直懷疑是引物的問題，現(xiàn)在已經(jīng)黔驢技窮了，不知道從什么地方改進(jìn)，能想到的方法我都想了，改進(jìn)pcr體系，換酶，連接體系等，求求大家提點建議啊 |
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2樓2021-02-16 18:43:31
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