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[求助]
用DNS法測(cè)定半纖維素酶的活性 已有1人參與
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| 在用DNS法測(cè)定半纖維素酶活性的實(shí)驗(yàn)中，采用的是紫外可見分光光度計(jì)測(cè)量?jī)x器，在建立標(biāo)線時(shí)，GB上的測(cè)定的是540nm的吸光度，而我做的實(shí)驗(yàn)是在471-479nm之間有吸光度，且隨著木糖濃度的增大，最大吸光度出現(xiàn)了右移的情況。請(qǐng)問各位大神，有沒有這方面的經(jīng)驗(yàn)，求指點(diǎn)。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 和光強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度、響應(yīng)限有關(guān)。儀器所能檢測(cè)的始終都是溶液的透光率，吸光度是換算的。在濃度非常高的時(shí)候，溶液的透光率在2%以下，以氘燈/鈉燈為光源，用光柵分波長(zhǎng)的話，儀器測(cè)得的電壓大概在0.1mV，這個(gè)時(shí)候多那么個(gè)0.1%和0.2%差別很大嗎？很多檢測(cè)器測(cè)不出來(lái)的。這個(gè)時(shí)候按照分光光度計(jì)測(cè)量值繪標(biāo)準(zhǔn)曲線圖就會(huì)發(fā)現(xiàn)高濃度部分向下偏離曲線。表現(xiàn)在HPLC上就是平頭峰。 |
2樓2020-12-15 16:25:31
3樓2020-12-17 09:11:05
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