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| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者星石的將贈送您 100 個金幣 | ||
[求助]
如何判斷小分子化合物阻礙了兩個蛋白的結(jié)合？ 已有1人參與
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生物新手，諸多不懂，請多包涵~~ 目前已知A（跨膜蛋白）和B(分泌酶)結(jié)合，A是B復(fù)合物的一部分，A 可以調(diào)節(jié)B的活性，現(xiàn)在我篩選到一個小分子化合物，體外驗證了該化合物能夠阻礙A和B的結(jié)合，請問下一步該怎么做呢？ 1.已知A和B的作用位點是B上的BS1區(qū)域，如果最終目的是想要確定該小分子化合物是存在潛在藥物活性的小分子，我應(yīng)該怎么去驗證��？細(xì)胞內(nèi)和小鼠模型中？ 2.還需要對A蛋白進(jìn)行基因敲除確定A上的哪一部分與小分子作用阻止了A與B的結(jié)合么? 3.基因敲除和基因突變在功能驗證上有什么區(qū)別么？ 有懂得多的大佬可以幫我全部回答，有只能回答一部分問題的也可以回答，我都會給金幣�。。。�！ 謝謝各位兄弟姐妹的幫助~~在線等，挺急的  |
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fuyuandj86
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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既然你已經(jīng)體外驗證出來小分子會抑制A-B相互作用了，體內(nèi)實驗就不用糾結(jié)這一點了。 接下來可以驗證小分子會影響A-B相互結(jié)合所導(dǎo)致的下游信號通路或基因表達(dá)的變化。在敲除A或B的細(xì)胞里，小分子不會影響這些下游信號通路或基因表達(dá)，進(jìn)而證明小分子是依賴于A或B發(fā)揮作用的。 另外如果一個小分子可以抑制A和B的相互作用，大多數(shù)情況是不會既和A結(jié)合也和B結(jié)合的。你可以進(jìn)一步研究小分子是和A結(jié)合，還是和B結(jié)合。 |
2樓2020-11-18 13:13:14
3樓2020-11-18 13:25:35
fuyuandj86
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4樓2020-11-18 14:48:30
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