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安徒生九日新蟲 (初入文壇)
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[交流]
藍白斑篩選，分離pGBT9和pGADT7
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各位大佬，最近我在做酵母雙雜，要從酵母中提取陽性的質(zhì)粒并分離，主要包含了pGADT7和pGBT9兩種，由于酵母沒有質(zhì)粒的不相容性，直接提取會得到兩種質(zhì)粒的混合物，而兩種質(zhì)粒又都是amp抗性，也無法用抗生素分離 如圖，pGBT9含有這兩個domain，但是不含lacI以及l(fā)ac repressor，而pGADT7載體不含lac相關(guān)基因序列，是否可以利用這個差異來篩選？轉(zhuǎn)入pGBT9的在含有x gal的LB（amp抗性）平板上呈現(xiàn)藍色菌落，轉(zhuǎn)入pGADT7的為白色菌落，且不需要IPTG的誘導(dǎo)。 PS：我們實驗是一直在使用貴公司的trelief 5α感受態(tài)做轉(zhuǎn)化，應(yīng)該跟DH5α沒什么太大差異。 望解答，謝謝 微信圖片_20201021222450.png |
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安徒生九日
新蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
2樓2020-10-21 22:30:55
3樓2020-10-23 13:42:48
4樓2021-01-08 16:40:28
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