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Hydra262銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
芽孢桿菌發(fā)酵上清液中抑菌物質(zhì)分析求助
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我最近在做芽孢桿菌發(fā)酵上清液中抑菌物質(zhì)分析試驗(yàn),用的是LB培養(yǎng)基培養(yǎng)芽孢桿菌,得到發(fā)酵液后離心棄菌體取上清液過0.22μm膜,得到含有菌體分泌抑菌物質(zhì)的上清液。本來下一步是想通過一些顯色反應(yīng)(雙縮脲、考馬斯亮藍(lán)啥的)初步確定下上清液中的抑菌物質(zhì)是否為蛋白質(zhì)或者多肽,然后接著用飽和硫酸銨法預(yù)先純化該抑菌物質(zhì),但是突然想到一個(gè)問題,LB培養(yǎng)基里面不是本身就含有胰蛋白胨和酵母膏嘛,這兩種物質(zhì)應(yīng)該是有蛋白質(zhì)、氨基酸或者是肽類的成分在里面吧,那我上清液里面的顯色反應(yīng)怎么判斷是培養(yǎng)基自身的還是抑菌物質(zhì)造成的呢?后面再用硫酸銨沉淀,又怎么確定沉淀下來的是哪個(gè)蛋白呢。還望各位大佬不吝賜教下,指點(diǎn)迷津 |
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