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absinbio
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白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)
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1.LIF的產生 已在活化的T細胞、單核細胞、神經(jīng)膠質細胞、肝成纖維細胞、骨髓基質細胞、胚胎干細胞、胸腺上皮細胞等多種細胞中發(fā)現(xiàn)有LIF的表達。 2.LIF的分子結構和基因 人和小鼠LIF基因分別定位于第22號和第11號染色體，基因長度分別人6.0kb和6.3kb，均含有3個外顯子和2個內含子，基因編碼區(qū)域具有高度的保守序列，其同源性在78~94%。LIF為180個氨基酸，核心蛋白分子量為20kDa，有7個糖基化位點，6個Cys，分子內部二硫鍵對于維持LIF分子的結構和生物學活性可能起重要作用。由于糖基化程度的不同，LIF分子量和電荷有所差別，分子量38~64kDa，IP8.6~9.2。LIF體外生物學功能似乎與糖基化程度無關，但糖基化是否影響LIF在體內穩(wěn)定性和功能尚待確定。人和小鼠LIF在氨基酸水平上有78%同源性，人LIF對鼠源性細胞有相似的活性，而小鼠LIF對人的細胞則作用很弱。在氨基酸水平上，LIF與抑瘤素-M(oncostatin M，OSM)和睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)有一事實上的同源性，而且在蛋白質分子二級結構上也有相似之處。 3.LIF的受體 ILF受體α鏈為低親和力受體，其結構屬于紅細胞生成素受體家族成員，含有2個該家族特征性結構域。gp130是LIF受體的另一個亞單位，與LIF受體α鏈共同組成高親和力受體。LIF受體分布較廣泛，如脂肪細胞、成骨細胞、神經(jīng)細胞、胚胎癌細胞、胚胎干細胞、M1白血病細胞以及活化的巨噬細胞等。 4.LIF的生物學活性 (1)調節(jié)細胞的增殖、分化和表型:LIF抑制小鼠胚胎干細胞(embryonic stem cell,ES)的分化。對于造血系統(tǒng)中的腫瘤細胞，LIF常顯示出抑制效應，同時誘導這些腫瘤細胞的分化，例如LIF可抑制小鼠白血病M1細胞的增殖，誘導其轉變?yōu)榫奘杉毎硇�，如表達Fc受體，并獲得吞噬能力等。對單核細胞的分化也超誘導作用。LIF與GM-CSF、G-CSF或IL-6協(xié)同抑制HL-60和U937細胞的生長，并誘導其分化。LIF增強IL-3對巨核細胞前體的造血干細胞的致有絲分裂作用，提高體內巨核細胞和血小板的數(shù)量。LIF還可促進成肌細胞的增殖。在一定條件下，LIF可促進新生大鼠背根神經(jīng)節(jié)中的神經(jīng)元表型從腎上腺素能型轉變?yōu)槟憠A能型，因此LIF又稱為膽堿能神經(jīng)元分化因子(cholinergic neuronal differentia-tion factor,CNF)。此外，LIF還可促進移植神經(jīng)嵴分化的胚胎性神經(jīng)元的存活。 (2)抑制脂蛋白脂酶活性，降低3T3-L1脂肪細胞對游離脂肪酸的攝取。 (3)促進骨的重吸收，這種作用可能是通過LIF刺激成骨細胞合成前列腺素所介導的。 (4)誘導肝臟急性期蛋白的產生。 hLIF和mLIF的發(fā)現(xiàn)者--澳大利亞Donald Metcalf實驗室研究證實，hLIF對小鼠M1髓系白血病細胞的誘導分化能力與mLIF相同或更好，也就是說hLIF完全可以替代mLIF來培養(yǎng)小鼠細胞。 更重要的是，1988年Donald Metcalf在Nature上饌文專門比較了hLIF和mLIF在維持mES細胞未分化狀態(tài)的能力，發(fā)現(xiàn)兩者完全一致，且最適用量均為1000 units/ml。 有趣的是，hLIF可完全替代mLIF作用于小鼠細胞，但反過來，mLIF卻對人的細胞無效。這是什么原因呢？ 研究表明，hLIF可與小鼠細胞上的mLIF受體(mLIF-R)結合，且親合力高于mLIF與mLIF受體的結合，這可能是hLIF對小鼠M1髓系白血病細胞的誘導分化能力比mLIF更好的原因。而mLIF不能與人細胞上的hLIF受體(hLIF-R)結合。所以mLIF不能用于培養(yǎng)人的細胞。 綜上所述，hLIF和mLIF在培養(yǎng)mES上的性能完全相同，可以相互替代，也就是說，完全可用hLIF來培養(yǎng)mES。 Recombinant Human Leukemia Inhibitory Factor/LIF |
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