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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 關于測定異淀粉酶酶活的問題
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ap372767129鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
關于測定異淀粉酶酶活的問題
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各位老師，目前我在使用碘法測定異淀粉酶活力。按道理來說，加入異淀粉酶脫支后反應的產(chǎn)物，再加入碘顯色在610 nm下吸光度值會升高。但是我發(fā)現(xiàn)在酶反應后的產(chǎn)物中加入碘液（100 μL反應產(chǎn)物+100 μL 0.01 M I2-0.1 M KI）會迅速生成很多小顆粒狀沉淀，再加7.8 mL水稀釋后，顆粒沉淀雖然部分溶解但仍然會有很多細小顆粒存在，這樣就嚴重影響樣品平行性。之前做過加入稀釋后的碘液測，雖然沒有顆粒沉淀產(chǎn)生，但是樣品之間吸光度無顯著差異。如何才能防止顆粒狀沉淀的生成呢？我看文獻中操作都是產(chǎn)物中加入碘再加水，顯色一段時間后直接測定其吸光度值。但是我的樣品出現(xiàn)沉淀，這就導致樣品之間平行性十分差。請懂的老師不吝解答，謝謝！ |
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