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WB陽性對照如何用蛋白標準品配置上樣溶液?
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如題,最近想驗證兩支一抗,由于之前用該一抗直接孵動物組織提取液沒能曝出條帶,這次想加一孔蛋白標準品作為陽性對照。 1、我的動物組織提取是用RIPA+cocktail裂解,loading buffer和ddH2O調(diào)濃度,用蛋白標準品的話也是一樣加這些溶液嗎? 2、還需要100℃金屬浴10min嗎? 3、動物組織最后是按總蛋白50ug來上樣的,那這個蛋白標準品加多少合適?我看有文獻中用了ng或pg級,還望高人指點清楚orz |
新蟲 (正式寫手)
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