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木木宮新蟲 (小有名氣)
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[求助]
水解酶活性測試？ 已有1人參與
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嗜熱菌接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在合適的條件下培養(yǎng)到Abs600值1.0，4℃下進(jìn)行離心。上清液用于溶解副球菌。副球菌接種到 LB 培養(yǎng)基中，37 ℃條件下培養(yǎng)72 h，使其達(dá)到平臺(tái)期。副球菌培養(yǎng)液離心后收集菌體，采用新鮮的Tris-HCl緩沖液重懸，并將 Abs540調(diào)整到1.4。細(xì)胞懸浮液與芽孢上清液等體積混合，60 ℃水浴水解。在540 nm處測定細(xì)胞懸浮液的吸光度。 請問有沒有懂這段話的，60攝氏度水解是干嘛的？吸光度測得是什么呢？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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minime86
木蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物化工與食品化工
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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應(yīng)該是在60度時(shí)進(jìn)行嗜熱菌溶解副球菌實(shí)驗(yàn)。吸光度測的是微生物細(xì)胞濃度。 參考以下文獻(xiàn)內(nèi)容：“2.0mL 嗜熱菌培養(yǎng)上清液(或 Tris-HCl 緩沖溶液)與 2.0mL 待溶胞微生物菌懸液混合(混合液 OD540控制在0.6~0.7,總體積為4.0mL)后,60℃水浴 保溫,并定期測定 OD540.緩沖溶液與菌懸液的混合 液作為對照,根據(jù)吸光度變化判斷溶胞情況” 宋玉棟, 胡洪營, and 李鑫. "嗜熱溶胞土芽孢桿菌 (Geobacillus sp.) SY-9 的基本特性." 中國環(huán)境科學(xué) 27, no. 4 (2007): 0-0. |
2樓2020-05-18 05:30:37
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