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青衿韻新蟲 (正式寫手)
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[求助]
NO生成抑制實驗中griess試劑490nm測量空白OD值在0.2，標曲也這樣，什么原因？
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| 我用1ug/ml的 lps 刺激小鼠巨噬細胞，在lps刺激細胞24小時的過程中用的是帶5%血清和1%雙抗的DMEM完全培養(yǎng)液，標曲也是用帶5%血清和1%雙抗的DMEM完全培養(yǎng)液配置。每孔種板了1.5萬個左右的細胞，陽性對照用50 uM的地塞米松和精氨酸。加入promega進口的griess試劑后，用酶標儀測量,因為實驗室沒有540nm左右的波長，所以用490nm的波長測量。lps陰性對照在0.32左右，空白對照0.24左右，陽性對照在0.22左右，化合物50 uM濃度下OD值為0.24左右。不知道為什么我的空白對照每次OD值都大于0.2了，這次實驗空白的OD值比地帶米松的值還高。即便是標曲，用帶5%血清和1%雙抗的DMEM完全培養(yǎng)液配置0uM濃度NaNo2,加格式試劑后OD值也有0.20. 希望有經驗的蟲友能助我解惑，萬分感謝！ |
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