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EDC/HoBt在水相中催化酰胺反應(yīng)的諸多疑問！ 已有1人參與
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本人最近在做透明質(zhì)酸（HA）的羧基與胱胺二鹽酸鹽（CYS）的氨基生成酰胺的反應(yīng)。結(jié)果打核磁發(fā)現(xiàn)CYS并沒有接上去。想請教一下各位大佬原因！ 1）反應(yīng)溶劑。因?yàn)橥该髻|(zhì)酸只溶于水，通過參考文獻(xiàn)，我選擇了pH6.8的磷酸鹽緩沖液作為反應(yīng)溶劑。 2）催化體系。因?yàn)镹HS水溶性不好，所以我用的是EDC.HCl和HoBt（HoBt是溶解到極少量的DMF中加入的）. 3）活化時(shí)間。我選擇了攪拌活化2h后再加入CYS 咨詢了一些師兄師姐，但是還是沒搞明白，有幾個(gè)問題要問： 1）pH的調(diào)節(jié)問題。因?yàn)镋DC.HCl和CYS都帶鹽酸，所以加入之后反應(yīng)體系的pH大概下降到5左右。 有必要通過加入NaOH把pH調(diào)回6.8嗎？ 有人說EDC.HCl的最佳pH在4-6之間。但是，有人又說pH過酸會影響氨基部分的活性。 2）活化時(shí)間。 催化形成的活性酯在水溶液中是不是非常不穩(wěn)定，所以我應(yīng)該縮短活化時(shí)間到15min-30min嗎？ 3）在查閱文獻(xiàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)有人用的EDC.HCl/sulfo-NHS，sulfo-NHS的水溶性比NHS要好些，但是跟HoBt相比，價(jià)格實(shí)在是有點(diǎn)過高了。 但是從機(jī)理上分析HoBt和sulfo-NHS的作用都是相同的。我有必要改用sulfo-NHS嗎？ 馬上就要研三了。疫情耽誤了三個(gè)月的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。現(xiàn)在材料合成不出來，整個(gè)人非常著急，求求有過經(jīng)驗(yàn)的大家給出一些有用的意見！感激不盡！！@liuanan@liubin |
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2樓2020-06-30 15:53:13
3樓2020-07-01 21:30:55
Targeting靶
鐵蟲 (初入文壇)
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4樓2020-07-09 10:02:43
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