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落日余暉34木蟲 (正式寫手)
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[求助]
畢赤酵母GS115與pPICZαA一起使用時，高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中組氨酸的添加問題 已有1人參與
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樓主最近采用pPICZαA構(gòu)建了一株GS115工程菌，在用YPD培養(yǎng)二級種子后， 采用高密度發(fā)酵培養(yǎng)基FM21進(jìn)行高密度發(fā)酵，該培養(yǎng)基的配方為：1L 培養(yǎng)基中含 85％ H3PO4 26.7ml ；CaSO4·2H2O 0.93g ； K2SO4 18.2g ；MgSO4·7H2O 14.9g ；KOH 16.72g ；甘油 40g ；PTM 14.0ml。 加去離子水至 1L， 氨水調(diào)節(jié) pH 至 5.5。 當(dāng)培養(yǎng)至20多小時后OD漲到10幾不增加了，突然發(fā)現(xiàn)GS115是組氨酸缺陷型，而pPICZαA載體上也不含有組氨酸合成基因，采用的FM21高密度發(fā)酵培養(yǎng)基也沒有組氨酸，是不是選擇的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基不對呢？猜測是種子培養(yǎng)基中的組氨酸消耗完了導(dǎo)致培養(yǎng)24小時后OD不再增加，有對這方面比較了解的蟲友嗎？按道理說，不含組氨酸，GS115是無法生長的。@天使托 |
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落日余暉34
木蟲 (正式寫手)
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2樓2020-04-04 21:30:50
研究啥123
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3樓2021-12-09 21:56:03
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