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licherish鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
黃曲霉RNA提取問(wèn)題
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最近在做黃曲霉的建庫(kù)測(cè)序?qū)嶒?yàn),但是第一步就卡了殼。普通菌種黃曲霉,液體搖床培養(yǎng)孢子,2天養(yǎng)成菌絲球,之后無(wú)菌水漂洗,液氮速凍,干冰送往華大武漢部,提取RNA之后建庫(kù)測(cè)序。這是對(duì)照,另外還送了兩個(gè)加了抑菌劑的處理組。現(xiàn)在的情況是對(duì)照組除了一次是風(fēng)險(xiǎn)之外,另外的5次全部是不合格,28S/18S是0,而處理組都在2次之內(nèi)RNA提取成功,F(xiàn)在問(wèn)華大是什么原因,他們只說(shuō)是對(duì)照組RNA降解了。請(qǐng)問(wèn)壇子里的各位大神,這種情況怎么辦呢?黃曲霉對(duì)照組里的多糖太多了嗎?RNAase太多了嗎?是否需要在培養(yǎng)液中加DEPC的dd水,另外,送樣品能否送冷凍干燥的呢? RNA都提取不出來(lái),后面實(shí)驗(yàn)根本沒(méi)辦法開(kāi)展啊,向壇子里的朋友求助,先謝謝各位啦! ![]() ![]() |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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