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victor_u新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
親和介質(zhì)的組成
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基質(zhì) 基質(zhì)用于吸附配基，具有理化惰性，可以支持配基通過(guò)直接或間接的方式偶聯(lián)到基質(zhì)上。高效的色譜基質(zhì)應(yīng)具有以下特性： 1.具有相當(dāng)?shù)偷姆翘禺愋晕�，其根本原因是由于親和色譜的成功依賴(lài)于特異性的相互作用 2.糖殘基上的羥基基團(tuán)容易被衍生化，可以使配基共價(jià)附著在上面，為形成親和介質(zhì)提供一個(gè)理想的平臺(tái) 3.具有開(kāi)放的孔狀結(jié)構(gòu)，保證高容量結(jié)合，甚至可以結(jié)合大的生物分子，基質(zhì)的惰性對(duì)于配基的吸附作用是有效的 4.具有好的流動(dòng)特性，適于快速分離 5.在實(shí)驗(yàn)所需要的范圍內(nèi)具有穩(wěn)定性 配基 配基能夠可逆的結(jié)合特定目標(biāo)分子或者目標(biāo)分子基團(tuán)的分子 在親和色譜純化中，配基的選擇受兩種因素影響：配基與目標(biāo)物的結(jié)合必須具有特異性和可逆性，并且必須具有化學(xué)修飾基團(tuán)，可以使它吸附在基質(zhì)上，并且不損害它的活性 間隔臂 通過(guò)克服任何空間位阻效應(yīng)，提高基質(zhì)和目標(biāo)分子的結(jié)合 目的蛋白的結(jié)合位點(diǎn)經(jīng)常位于分子中較深的部位，并且一個(gè)親和介質(zhì)的制備是通過(guò)偶聯(lián)小的配基，例如酶輔助因子，將其直接偶聯(lián)到Sepharose上，因此由于空間位阻的影響，目標(biāo)蛋白質(zhì)與配基僅能夠展示出較低的結(jié)合能力，例如配基不能接近目標(biāo)分子的結(jié)合位點(diǎn)，在這些環(huán)境中，在基質(zhì)和配基之間插入一個(gè)“間隔臂”可以使結(jié)合更加容易。間隔臂的設(shè)計(jì)必須使結(jié)合達(dá)到最大化，但需要避免非特異性結(jié)合效應(yīng)。 |
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2樓2020-03-27 08:58:32
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