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liushujian新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問(wèn)“瓊脂糖的凝膠強(qiáng)度”是什么意思 已有3人參與
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| 想用瓊脂糖做實(shí)驗(yàn)，參考文獻(xiàn)上是這樣寫(xiě)的 “Agarose (gel strength 1300 g cm-2) was purchased from Vivantis” 我不太懂這個(gè)“凝膠強(qiáng)度”是什么意思，普通的瓊脂糖可以嗎？在賣試劑的網(wǎng)站上也沒(méi)有查到。哪位大神知道，幫幫忙，非常感謝。 |
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2樓2020-03-30 14:11:56
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3樓2020-04-08 11:50:58
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【答案】應(yīng)助回帖
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普通的核酸瓊脂糖凝膠電泳隨便買個(gè)電泳甚至進(jìn)口普通級(jí)（比如vetec）就夠了。所謂凝膠強(qiáng)度，就是耐受壓力而不破碎時(shí)能夠承受的最大壓強(qiáng)。凝膠強(qiáng)度太高，高濃度（比如1.5%）就會(huì)太硬，buffer就很難進(jìn)去了；凝膠強(qiáng)度太低，像我用的，0.5%的膠如果配大體積，拔梳齒非常容易把底部拉碎。只要在合適的范圍內(nèi)應(yīng)該不影響實(shí)驗(yàn)。如果你是特殊實(shí)驗(yàn)，比如要配置瓊脂糖和丙烯酰胺混合的蛋白凝膠，那就按文獻(xiàn)吧。 如果就是核酸分離實(shí)驗(yàn)，我覺(jué)得文獻(xiàn)里對(duì)這個(gè)有要求實(shí)際上就是照搬了試劑的說(shuō)明而已，并不是非要這樣不可，發(fā)過(guò)文章你就有這種體會(huì)了，其實(shí)就是小心無(wú)大錯(cuò)，多數(shù)時(shí)候并不是真的那么嚴(yán)格。 |
4樓2020-04-08 13:07:56
ECUST_CAPF
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【答案】應(yīng)助回帖
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就是agrose/buffer w/v 質(zhì)量體積比吧 不同的濃度凝固后的膠硬度不一樣，當(dāng)然agrose的分離效果也不同，常規(guī)的分離核酸電泳實(shí)驗(yàn)不用考慮，你看看你買的marker上推薦的濃度就行，一般很大的核酸用濃度低一些，0.5% 1%都是萬(wàn)能的基本，比較小的用高一些的，2%，2.5% ，一般電泳實(shí)驗(yàn)級(jí)別的沒(méi)有見(jiàn)過(guò)更高的了 如果你用agrose填料裝柱，分離蛋白或者其他物質(zhì)，可能需要的agrose級(jí)別就有差異了，具體你可以詳細(xì)描述一下你想做什么 |
5樓2020-04-09 14:31:30
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