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好孩子壞孩子金蟲 (著名寫手)
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[交流]
引物高GC，pcr體系怎么調(diào)整 已有4人參與
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擴(kuò)增一段cds區(qū)域，片段GC含量在50％左右，但是引物區(qū)GC含量在80％左右，用了takara的premerstar酶進(jìn)行擴(kuò)增，退火溫度58度，只能擴(kuò)增出雜帶，沒有目的片段，請問這種情況，應(yīng)該怎么調(diào)整pcr體系和條件呢？求大神幫助 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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添加合適GC緩沖液；適當(dāng)延長引物；退火溫度設(shè)置梯度；換酶。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
好孩子壞孩子2樓2019-12-12 07:23:05
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考慮片段大小，模板類型，更換擴(kuò)增酶 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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3樓2019-12-12 12:55:30
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4樓2019-12-13 00:20:04
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5樓2019-12-13 00:20:18
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你好 你的引物高CG含量擴(kuò)增成功了嗎 我現(xiàn)在遇到同樣問題了 可以分享下解決辦法嘛 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2020-01-10 19:10:51
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