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如何選擇內(nèi)參抗體
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本人準(zhǔn)備做WB實(shí)驗(yàn),要做三個(gè)抗體,一個(gè)是細(xì)胞核蛋白,一個(gè)是細(xì)胞質(zhì)蛋白,一個(gè)是細(xì)胞膜蛋白,可以用同一個(gè)內(nèi)參蛋白β-actin嗎?哪家公司的內(nèi)參蛋白抗體比較好用? |
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建議如下:細(xì)胞核蛋白一般有兩種選擇:常用的為Histone-H3,組蛋白Histone H3.1由于是染色體的組成型表達(dá)組分,表達(dá)比較穩(wěn)定,經(jīng)常被作為最廣泛的核內(nèi)參使用。目標(biāo)蛋白15kd左右,。另外一種是增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),PCNA即增殖細(xì)胞核抗原,因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名,以后的研究發(fā)現(xiàn)PCNA與細(xì)胞DNA合成關(guān)系密切,在細(xì)胞增殖的啟動(dòng)上起重要作用,是反映細(xì)胞增殖狀態(tài)的良好指標(biāo)。在細(xì)胞核內(nèi)合成,并存在于細(xì)胞核內(nèi),其由261個(gè)氨基酸組成,分子量為36KD。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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膜蛋白選擇Na/k泵通道蛋白(Na+/K+-ATPase),Na+/K+-ATPase即Na+/K+-ATP酶或Na+/K+-ATP泵,它會(huì)使細(xì)胞外的Na+濃度高于細(xì)胞內(nèi),當(dāng)Na+順著濃度差進(jìn)入細(xì)胞時(shí),會(huì)經(jīng)由本體蛋白質(zhì)的運(yùn)載體將不易通過細(xì)胞膜的物質(zhì)以共同運(yùn)輸?shù)姆绞綆爰?xì)胞。其由1023個(gè)氨基酸組成,分子量為113KD。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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細(xì)胞質(zhì)蛋白有多種可以選擇,GAPDH 36KDa,肌動(dòng)蛋白(β-Actin)42 kDa,α-tubulin和β-tubulin分子量分別為55kDa和50kDa,其實(shí)際檢測(cè)條帶均在55kDa左右。β-tubulin的蛋白水平通常不會(huì)發(fā)生改變。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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