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[求助]
合成陽離子高分子，瓊脂糖實(shí)驗(yàn)3/1完全吸附pDNA但轉(zhuǎn)染15/1轉(zhuǎn)不進(jìn)去。求指點(diǎn)�。。�！
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合成的高分子材料帶有正電荷，電位25mV。瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)證明材料/pDNA=3/1（W/W）即可完全吸附。因此做細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，但現(xiàn)在轉(zhuǎn)不進(jìn)去。情況如下：293T細(xì)胞，lipo和PEI作對(duì)照轉(zhuǎn)染RFP作用4h換液繼續(xù)24h--對(duì)照組熒光非常強(qiáng)（排除方法問題），材料方法和兩個(gè)對(duì)照組相同-轉(zhuǎn)染RFP作用4h后換液繼續(xù)培養(yǎng)24h--5/1,10/1和15/1的比例都轉(zhuǎn)不進(jìn)去 請(qǐng)問：誰做過陽離子型材料，你們轉(zhuǎn)染的方法是什么？有無遇到過能夠吸附pDNA但卻轉(zhuǎn)不進(jìn)細(xì)胞的情況？ 怎么改進(jìn)？ 求交流�。。�！ |
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2樓2019-10-28 09:29:15
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