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藍(lán)天白云_新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)胞實驗遇到難題,實在沒辦法了求助請大家看一看 已有4人參與
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各位老師好,我養(yǎng)的是HepG2肝癌細(xì)胞,我的實驗需要測細(xì)胞內(nèi)一些指標(biāo)比如TC,TG,糖原等,把細(xì)胞接到12孔板或6孔板后,培養(yǎng)一天,細(xì)胞鋪滿90%后,棄掉培養(yǎng)液,PBS潤洗,加入對照組和模型組樣品組(對照組和造模液都是用無糖無酚紅的DMEM加BSA和葡萄糖),加樣的步驟是:先用移液槍棄掉培養(yǎng)基,,PBS潤洗,加入對照組和模型組培養(yǎng)液,問題是每次加樣品一天后所有的孔都會污染,但是所有的試劑用之前都過濾了,重復(fù)實驗還是這樣,濾膜沒有問題,移液槍也沒有問題,生物安全柜也沒有問題,這些我都排除過了,過濾除菌后的試劑單獨接到孔板里也沒問題,正常傳代培養(yǎng)的細(xì)胞也沒有污染,細(xì)胞接到孔板里一天后,加樣之前也也正常,只要一加樣,一天后就污染,整個培養(yǎng)液都渾濁發(fā)臭,會不會是我操作的問題?重復(fù)實驗很多次了,每次都很小心,并且試過12孔板中留兩個孔不做任何處理,這兩個孔就沒有污染,其他的都污染了。真的沒辦法了,我導(dǎo)師說沒遇到過這種情況,我懷疑是細(xì)胞本身有問題,或者是造模液 @gyesang @gyesang @hc-material 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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