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木冰衿→_→新蟲 (正式寫手)
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[求助]
衡量催化能力的話，請問酶活和比酶活我應(yīng)該看哪個(gè)指標(biāo)呢？ 已有2人參與
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最近在全物種找催化能力最強(qiáng)的某種酶，想大腸桿菌表達(dá)出酶做催化，但是不知道應(yīng)該看哪個(gè)指標(biāo)才能衡量催化能力。 1. 得到的指導(dǎo)是說看SPECIFIC ACTIVITY 也就是比活，但是我查了下比活是衡量純度的指標(biāo)，用在這里是否不妥？ 2. 因?yàn)槲掖呋胗么置敢�，而查到的文獻(xiàn)大多用純化后的酶測量的數(shù)據(jù)，所以提純過和沒提純過的酶的比活是否不同？文獻(xiàn)的數(shù)據(jù)是否有參考意義？ 3. 如果不能用比活，那么我應(yīng)該查找什么指標(biāo)衡量酶的催化能力？@hc-material |
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原海亮
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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如果是作為酶催化能力的體現(xiàn)，當(dāng)然是要選擇酶活來衡量，包括在實(shí)際的工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用中，計(jì)算酶使用量的時(shí)候，一般都是催化一定量的底物，需要多少酶活來計(jì)算，不會(huì)使用比活力。 也如你所講，比活在某種意義上就是一個(gè)純度的體現(xiàn)，即每單位酶產(chǎn)品所具有的酶活，打個(gè)比方，一個(gè)反應(yīng)需要1000U的酶，你用比活力低的粗酶液，可能需要加入10g的量才能達(dá)到酶活總量（比活是100U/g），而如果使用比活較高的純化后蛋白，純度高，單位質(zhì)量含有的酶蛋白量要比粗酶液高，可能加個(gè)1g就可以了（比活是1000U/g）。 而目前工業(yè)酶的使用中，很少使用純化后的蛋白，成本太高，絕大多數(shù)還是使用粗酶液或者粗酶粉，你看的文獻(xiàn)都是科研院所實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行科學(xué)研究的成果，他們不考慮成本的，可以使用昂貴的純化填料以及設(shè)備等等，為的是獲得一個(gè)準(zhǔn)確的理論研究數(shù)據(jù)，比活越高證明他們獲得的產(chǎn)品純度或者含量越高。但實(shí)際應(yīng)用中，還是需要考慮各種實(shí)際成本（附加值高的產(chǎn)品除外）。 |
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木冰衿→_→
2樓2020-01-15 10:06:03
木冰衿→_→
新蟲 (正式寫手)
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3樓2020-01-15 17:06:53
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最關(guān)鍵的是看Km值，不是比活，我是生產(chǎn)酶的工廠：只要酶有活性就是有酶活，就不用檢測這個(gè)指標(biāo)了，除非你生產(chǎn)的沒有活性~比活是酶純度的意思：1mg廣義上的酶(凍干酶里面有緩沖鹽份)，有多少酶單位；對于底物確定的酶，酶的質(zhì)量若要好看Km：達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)底物的濃度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2020-05-19 14:24:03
【答案】應(yīng)助回帖
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最關(guān)鍵的是看Km值，不是比活，我是生產(chǎn)酶的工廠：只要酶有活性就是有酶活，就不用檢測這個(gè)指標(biāo)了，除非你生產(chǎn)的沒有活性~比活是酶純度的意思：1mg廣義上的酶(凍干酶里面有緩沖鹽份)，有多少酶單位；對于底物確定的酶，酶的質(zhì)量若要好看Km：達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)底物的濃度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2020-05-19 14:24:39
6樓2020-05-19 14:25:30
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