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哈娜醬木蟲 (正式寫手)
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[求助]
想請教酶催化反應(yīng)的IC50可否用液相來測定呢？ 已有1人參與
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如題，最近在做β-分泌酶抑制劑，需要測IC50，查了諸多文獻(xiàn)都是用熒光或者紫外分光光度計(jì)，能否用液相通過測定底物減少量來計(jì)算IC50呢？如有文獻(xiàn)感激不盡啦 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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原海亮
木蟲 (著名寫手)
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
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一般都是做成相應(yīng)的elisa來檢測的，這樣可以直接的反應(yīng)抑制劑與酶蛋白的結(jié)合，紫外和熒光是常用的兩種方法，具體是根據(jù)檢測標(biāo)記物的特性選擇合適方檢測方法和波長。 通過液相檢測目標(biāo)酶蛋白催化能力的變化，即底物消耗量的變化來反映抑制劑的作用效果，相對來講是一個(gè)間接的方法，但影響酶活力的因素不只有酶抑制劑，還有很多其他因素，所以獲得的數(shù)據(jù)可以定性看，量化起來沒有標(biāo)準(zhǔn)的公式來計(jì)算。 IC50是一個(gè)大家常用的一個(gè)參數(shù)，應(yīng)該有其適用性和通用性，所以還是使用最直接的反應(yīng)抑制劑與酶蛋白結(jié)合的方法較多一些。 |
2樓2020-01-15 10:28:19
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