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wwws_1224新蟲 (初入文壇)
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如何利用已知的知識(shí)，發(fā)現(xiàn)不一樣的世界
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最近中科院生物物理所劉志華團(tuán)隊(duì)在《Cell Research》上發(fā)表文章，發(fā)現(xiàn)腸菌促進(jìn)胰島素分泌的機(jī)制。該工作入選2019年Cell Research第七期封面論文。研究者綜合已知的發(fā)現(xiàn)，提出自己的假說，并嚴(yán)密論證自己的觀點(diǎn)（了不起，偉大！仰望�。�，今天我們學(xué)習(xí)一下的研究思路： Cell Research：腸菌促進(jìn)胰島素的分泌 ——Intestinal Lysozyme Liberates Nod1 Ligands From Microbes to Direct Insulin Trafficking in Pancreatic Beta Cells 期刊名： cell resreach，IF17.2 發(fā)表時(shí)間：2019-7 技術(shù)平臺(tái)：IF+IP 材 料： GF小鼠、SPF級(jí)小鼠、myd88 -/-小鼠 、Rip2-/-小鼠、Nod1-/-小鼠、Lyz1−/− GF小鼠、Lyz1−/− 小鼠 NS-1 832/13 cells、HEK293T cells 研究背景：2型糖尿病與腸菌結(jié)構(gòu)異常相關(guān)，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)腸菌影響胰島素分泌囊泡在胰島beta細(xì)胞中的分布，NOD1受體在胰島素耐受性，胰島beta細(xì)胞影響胰島素分泌，本文主要是探究腸道菌促使胰島素囊泡的成熟與分泌的機(jī)制的。 已知條件： 基因Rip2和Nod1影響胰島分泌 通過組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)L. plantarum菌及其代謝產(chǎn)物iE-DAP，影響胰島分布 溶菌酶影響胰島分布 求證：腸菌促進(jìn)胰島素分泌的機(jī)制 思路： 證明腸道菌群的必要性（GF VS WT） 證明因Rip2和Nod1的必要性及相關(guān)性 （找到Rip2和Nod1的相互作用機(jī)制） 證明腸菌代謝產(chǎn)物的充分必要性 證明溶菌酶的必要性 整理“溶菌酶-腸菌代謝產(chǎn)物-Rip2和Nod1”的邏輯關(guān)系，并提出假說 方案設(shè)計(jì)： 比較無菌小鼠與SPF小鼠胰島細(xì)胞。觀察胰島分泌情況 用WT小說和基因敲除小鼠（myd88 -/-和Rip2-/-）。觀察胰島分泌情況 通過Rip2f/f, Ins2Cre, and Rip2beta-cko mice。觀察胰島分泌情況 根據(jù)Rip2的功能，找到Nod1基因；構(gòu)建Nod1-/-小鼠及Nod1beta-cko小鼠。觀察胰島分泌情況 給GF小鼠添加細(xì)菌的代謝產(chǎn)物和其他物質(zhì)；給GF移植某些細(xì)菌。觀察胰島分泌情況 用細(xì)胞系INS-1 832/13 cells加藥物。觀察胰島分泌情況 用細(xì)胞系HEK293T cells和INS-1 832/13 cells。觀察Nod1 and Rip2的相互作用 用Lyz1−/− GF小鼠，GF小鼠加藥物，觀測(cè)Nod1的活性和胰島分泌情況 研究結(jié)果： 腸菌影響胰島分布（胰島b細(xì)胞）。 找到影響胰島分泌的基因Rip2和Nod1。 證明了某腸菌是胰島分泌的必要條件 證明Nod1 and Rip2的共同作用，是胰島分泌的必要條件 證明溶菌酶，是胰島分泌的必要條件 結(jié)論：胰島beta細(xì)胞通過表達(dá)胞內(nèi)細(xì)菌肽聚糖受體Nod1來感知腸道菌的配體信號(hào)，以協(xié)助胰島素囊泡的順勢(shì)轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)胰島素的分泌 總結(jié)：思路清晰，結(jié)論論證嚴(yán)密！ |
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