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Tengly新蟲 (初入文壇)
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[求助]
大鼠軟骨細(xì)胞的II型膠原免疫組織化學(xué)染色
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最近在做大鼠原代細(xì)胞的分離與鑒定，包括甲苯胺藍(lán)染色和II型膠原的鑒定，這個(gè)II膠原的鑒定，我是爬片、4%多聚甲醛固定、0.5%TritonX-100通透、5%山羊血清封閉，一抗4度過夜，二抗暗室孵育1h，但是在熒光顯微鏡下看不到顏色。 我看很多文獻(xiàn)，在這個(gè)操作的基礎(chǔ)上還要在用DAB和蘇木素復(fù)染。 問題一：為什么附完一抗二抗熒光顯微鏡下卻觀測不到呢？（二抗是帶熒光的） 問題二：為什么后面要用那兩個(gè)染色劑染呢？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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