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新蟲 (初入文壇)

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[求助] 同源克隆已有1人參與

利用同源保守區(qū)設(shè)計(jì)引物，PCR得到的產(chǎn)物總是大于預(yù)測(cè)的X 基因長(zhǎng)度，一直得不到目的條帶，所以猜測(cè)X 基因在不同的物種中的基因序列長(zhǎng)度是否存在差異？所以是否要將大于目的條帶的基因片段測(cè)序？請(qǐng)個(gè)各位大佬解疑。

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1樓 2019-07-10 16:58:20

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mql_csu

鐵蟲 (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

我沒做過，但是從字面上理解，1.是否考慮過內(nèi)含子；2.如果pcr條帶單一，雜帶不明顯，可以考慮測(cè)序（從預(yù)測(cè)序列中間找引物往兩邊測(cè)，測(cè)不出來也許并不花錢）�；蚪Mp東西，我的經(jīng)驗(yàn)是憑運(yùn)氣，非特異性問題還有發(fā)卡結(jié)構(gòu)什么的實(shí)在很難琢磨，不對(duì)就趕緊重新設(shè)計(jì)引物。

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回復(fù)此樓

2樓2019-07-13 15:10:26

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