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家住同福里新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求菌株復(fù)蘇和保存方法 已有3人參與
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如題，買了銅綠假單胞菌的菌株凍干粉，在網(wǎng)上也看了一些復(fù)蘇和保存的方法但是還有地方不清楚想問下各位蟲友們 1、打算用甘油低溫保存（-80℃），求問蟲友們在此條件下都是怎么保存的菌株條件會(huì)比較好？就是多少ml的菌液加上多少ml的甘油，甘油含量是多少，大概保存時(shí)間是多少。 2、在-80℃情況下保存菌株的話必須使用凍存管嗎？用普通的EP管行不行？ 3、不知道各位有沒有菌株復(fù)蘇和保存的教學(xué)視頻？本人新手小白，周圍都是養(yǎng)細(xì)胞的大佬們，沒有做這個(gè)的，想看看教學(xué)視頻更保險(xiǎn)一點(diǎn)，謝謝啦！ |
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4樓2019-07-09 20:30:45
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2樓2019-07-09 17:37:52
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3樓2019-07-09 17:38:05
xinxiyuzhou
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小冀-: 金幣+5, 鼓勵(lì)回帖交流，詳細(xì)，有幫助 2019-07-10 10:59:38
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| 甘油菌凍存時(shí)間至少一年以上是沒有問題的，時(shí)間估計(jì)可以更長。甘油的濃度是15%到30%，可以先用雙蒸水配成60%或者30的濃度，高壓滅菌，使用時(shí)與菌液1:1稀釋。普通的滅菌EPG就可以了。如果是常用的菌株，可以斜面劃線保種，斜面劃線這個(gè)你應(yīng)該會(huì)吧，過夜培養(yǎng)，第二天收起來，每次使用時(shí)用接種環(huán)挑一點(diǎn)到培養(yǎng)基里，斜面保種至少保存一個(gè)月沒有問題。一般拿到的菌種最好四區(qū)劃線(細(xì)菌的基本操作）得到單克隆，然后用接種環(huán)挑單克隆到LB培養(yǎng)基（不同細(xì)菌可能培養(yǎng)基不一樣），過夜培養(yǎng)（這時(shí)候也可以保種），或者收起來4度放置，晚上按1:50或者1:100的比例接種到5ml 培養(yǎng)基中，第二天再保種。如前面所說，取500微升菌液，加入500微升甘油，震蕩混勻，做好標(biāo)記（菌種名，抗性，日期等），封口膜封口，直接放置-80保存就行。 |
5樓2019-07-10 09:34:49
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