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Limax-Tang新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
同源重組(無(wú)縫克隆)做不出來(lái)，求解決/改進(jìn)方案。 已有2人參與
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在上海華東理工的實(shí)驗(yàn)室做同源重組效果很好，基本都比較容易的能挑出陽(yáng)性克隆;但同樣的實(shí)驗(yàn)在杭州浙江工業(yè)大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室做卻結(jié)果很差，不知道有沒(méi)有經(jīng)歷過(guò)類(lèi)似情況的同志提出寶貴的建議！萬(wàn)分感激！希望大家能多多交流~ 另外重組酶是上海翊圣的。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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wshdhr8
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 157.6
- 帖子: 89
- 在線: 55.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2588030
- 注冊(cè): 2013-08-08
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 細(xì)胞周期與調(diào)控
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我是一個(gè)板子多挑，本來(lái)挑了50個(gè)沒(méi)有，后天抱著僥幸心理又挑了50個(gè)，果然出了一個(gè) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2019-07-04 13:03:06
GRUBBY_WU
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 153 (高中生)
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- 在線: 153.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7859436
- 注冊(cè): 2018-02-01
- 性別: GG
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Limax-Tang: 金幣+10, ★★★很有幫助 2019-07-15 08:47:33
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Limax-Tang: 金幣+10, ★★★很有幫助 2019-07-15 08:47:33
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同樣的經(jīng)歷對(duì)于搞科研都應(yīng)該遇見(jiàn)不少，不過(guò)樓主之前已有成功經(jīng)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)流程上應(yīng)該沒(méi)有大的問(wèn)題，可能要細(xì)細(xì)擼一遍實(shí)驗(yàn)流程才能找到問(wèn)題，我之前也經(jīng)常做同源重組，SLIC，Gibson組裝都試過(guò)，公司的kit也用過(guò)不少，遇見(jiàn)不成功的最可能的問(wèn)題就是擴(kuò)的不好或者同源臂有問(wèn)題，仔細(xì)檢查下沒(méi)有問(wèn)題的話，可以考慮先買(mǎi)公司的kit做，安利genscript的genbuilder還可以，畢竟實(shí)驗(yàn)不等人，原因可以慢慢找。祝好。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2019-07-04 12:46:27
prthefu
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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4樓2019-08-06 15:51:15
學(xué)而不思則惘
新蟲(chóng) (初入文壇)
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我們實(shí)驗(yàn)室之前用的也是圣羽的，用著用著就做不出來(lái)了，后來(lái)?yè)Q了諾唯贊的就好了，我構(gòu)建到了9200bp片段+5000的pcdna3.1，但是現(xiàn)在最近一個(gè)月，我用諾唯贊死活做不出來(lái)。。。。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2019-08-14 22:42:27
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