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爆米花香_鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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藥物標(biāo)準(zhǔn)曲線如何繪制???
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想做一個(gè)藥物的標(biāo)準(zhǔn)曲線,用PBS做溶劑,紫外280nm有吸收。第一次做,過(guò)程中有幾個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教一下: 1.我們實(shí)驗(yàn)室用的是酶標(biāo)儀,可以用比色皿做紫外檢測(cè),不知和分光光度儀是否存在差別?由于“空白調(diào)零”這個(gè)我不知道怎么弄,所以每次數(shù)據(jù)都是先測(cè)一個(gè)PBS空白組的吸光度,后面藥物的數(shù)據(jù)減去空白組,可否? 2. 紫外檢測(cè)最低只測(cè)到0.5-1ug/ml左右的濃度,再低吸光度值就忽高忽低了(與PBS對(duì)比),最高檢測(cè)在1mg/ml左右,再高吸光度就over了。要求檢測(cè)的濃度大概是20ug/ml左右,所以這樣的濃度范圍做出的曲線可以用嗎? 3. 一般都是以吸光度0.2-0.8范圍的濃度做曲線,可是我的濃度在50ug/ml時(shí)才0.2,意思起點(diǎn)以50開(kāi)始?即橫坐標(biāo)是根據(jù)吸光度(0.2-0.8)對(duì)應(yīng)的濃度選擇,還是取最低檢測(cè)濃度梯度增加來(lái)作為橫坐標(biāo)呢? 4.對(duì)于吸光度,是原始數(shù)據(jù)作圖,還是減去空白組PBS的吸光度作圖呢,即0.2-0.8是指哪個(gè)吸光度? 謝謝大家! |
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