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水?W狐貍鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
細(xì)胞在材料上生長(zhǎng)的活死染色讓背景材料著色問(wèn)題 已有1人參與
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| 本人做的是生物材料，蛋白質(zhì)薄膜，在上面培養(yǎng)了PC12細(xì)胞，我們現(xiàn)在使用的活死細(xì)胞染料是Calcein-AM/PI，但是活染料感覺(jué)很容易把蛋白材料染上色，讓上面的細(xì)胞和背景材料的顏色亮度沒(méi)有太大差別，細(xì)胞就不太看得清了，想請(qǐng)教一下大家有沒(méi)有什么好辦法。我最近剛知道一種invotregen的叫做 alarmar blue assay的染料也可以用作活死染料， 有沒(méi)有其他有什么染料作為活死染料用的，不太會(huì)染上蛋白材料的可以使用？ |
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xinghailiuli
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你好，我也想在材料上養(yǎng)pc12，但是不知道選哪種形態(tài)的好，能問(wèn)一下，樓主用的是未分化的還是低分化或者高分化的細(xì)胞嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2019-09-18 14:50:05
水?W狐貍
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用的應(yīng)該是未分化的吧，后來(lái)還需要自己用神經(jīng)因子誘導(dǎo)，都是別人給的。。。自己摸瞎弄。。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2019-09-24 13:04:53
xinghailiuli
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好的呢，請(qǐng)問(wèn)誘導(dǎo)因子用的是EGF嗎？大概價(jià)格是多少啊？貴了估計(jì)老板不給買(mǎi) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
4樓2019-09-24 13:54:52
水?W狐貍
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5樓2019-09-24 19:45:58
【答案】應(yīng)助回帖
| 可能是染色液濃度太高了，找找最適濃度，參考方法：1.配制一定濃度區(qū)域的Calcein-AM和PI(Propidium Iodide)工作液；2.制備死細(xì)胞（可以用70%乙醇孵育一段時(shí)間）；3.用Calcein-AM分別染死細(xì)胞和活細(xì)胞，尋找沒(méi)有染死細(xì)胞，又能染活細(xì)胞的濃度，且清晰可見(jiàn)；再用PI染活細(xì)胞和死細(xì)胞，尋找沒(méi)有染上活細(xì)胞，又能染上死細(xì)胞的濃度，且清晰可見(jiàn)。具體可參考：Calcein-AM染色原理及使用說(shuō)明 |
6樓2022-11-08 09:15:59
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