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Newfish1鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
在大腸桿菌中異源表達酵母基因是否需要密碼子優(yōu)化 已有1人參與
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如題， 1.酵母基因表達系統(tǒng)和大腸有差異，那么異源表達其基因是否需要優(yōu)化 2.該基因5000bp左右，選擇什么啟動子比較合適 3.普遍來說，異源表達某基因還需要注意什么 感謝解答，千恩萬謝！ |
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sannny
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比如BL21（DE3）codonplus 比如Rosetta gami B 樓里有人說了啊，既然是酵母的蛋白，完全可以用畢赤酵母表達系統(tǒng)做啊。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2019-06-15 15:08:14
2樓2019-06-14 19:10:16
3樓2019-06-14 23:59:27
sannny
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2019-06-15 22:29:06
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2019-06-15 22:29:06
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鑒于序列太長，合成成本比較高，建議先擴增目的基因做表達，現(xiàn)在可以補充稀有密碼子的表達菌挺多的。另外就像樓上說的，蛋白太大，可能表達有困難，但也不是額絕對的，總歸要試試。做蛋白表達，千萬不要預設(shè)立場，比如哪個啟動子更好，要不要優(yōu)化之類的。合理的做法是不同的啟動子，不同的標簽的表達系統(tǒng)同時做。而不言先做一個，不行，換下一個。不然時間成本是很高的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2019-06-15 08:02:05
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