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wanrunlan新蟲 (初入文壇)
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底物和酶催化反應(yīng)反應(yīng)中Km值和KD值的相關(guān)關(guān)系
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大家好!我在研究底物和酶的催化反應(yīng)情況。我用MST直接測(cè)了底物與酶的KD值,也做酶活實(shí)驗(yàn)測(cè)了Km值。為啥審稿人會(huì)提出KD和Km單位相差之大的問題呢?“the Kd values were much lower than the Km values measured in the enzyme reactions. Although Kd is not Km, do the authors have an explanation of the large differences ? It is noteworthy that the Kd values determined were in the nanomolar range. The authors are referred to the paper by Yin et al., which determined the Kd for DHT binding to AKR1C2 using transient kinetic approaches and a value of 8 uM was obtained (Biochemistry 2006, 45: 13054).” 平衡解離常數(shù)KD=Kd/Ka,KD單位是M(mol/L);KD=[A][B]/[AB],KD可以表示出處于平衡狀態(tài)時(shí)AB的解離程度,KD越大說明解離越多,代表AB之間親和力越弱,KD越小說明解離越少,代表AB間親和力越強(qiáng); Km的含義是酶促反應(yīng)達(dá)最大速度(Vm)一半時(shí)的底物(S)的濃度。,即當(dāng)V=Vm/2時(shí),【S】=Km,單位為mol/l。Km是酶極為重要的動(dòng)力學(xué)參數(shù),其物理含義是指ES復(fù)合物的消失速度常數(shù)(k-1+k2)與形成速度常數(shù)(k1)之比。 除了它們都表示底物和酶的親和力(KD表示在穩(wěn)態(tài)情況下的親和力、Km表示在動(dòng)態(tài)情況下的親和力)外,它們有其它可以對(duì)應(yīng)的關(guān)系嗎? ![]() 不知該如何回答這個(gè)問題 |
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