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無奈被逼科研新蟲 (小有名氣)
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熒光定量PCR疑惑解答 已有1人參與
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普通PCR驗證引物,跑電泳,目的條帶還挺清晰的,引物二聚體也不是很明顯。然后選擇其中比較理想的條帶對應(yīng)的溫度,進行熒光定量PCR,包括退火溫度,退火時間,延伸時間都是跟普通PCR條件完全一致。為啥熒光定量跑出來的曲線都不能完全符合要求呢?要么溶解曲線起峰效果不好,有不止兩個峰的。要么闊增效率的值偏離1很多。為什么會出現(xiàn)這樣的問題呢? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (著名寫手)
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