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VVVctor銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
細(xì)菌電轉(zhuǎn)化的目的質(zhì)粒與基因組的整合過(guò)程是什么？
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背景：我往細(xì)菌里面電轉(zhuǎn)入了一個(gè)質(zhì)粒，上有幾個(gè)菌內(nèi)本身具有的基因�，F(xiàn)在PCR陽(yáng)性（引物是質(zhì)粒上的引物），質(zhì)粒電泳沒(méi)有目的條帶。有師兄說(shuō)是質(zhì)粒與基因組整合了。 問(wèn)題：我百度與谷歌過(guò)，但是可能是關(guān)鍵詞問(wèn)題沒(méi)有解決我的疑惑。 1.質(zhì)粒提取試劑盒提取會(huì)帶出微量基因組進(jìn)而影響我PCR的實(shí)驗(yàn)嗎？ 2.沒(méi)有質(zhì)粒電泳條帶的前提下，PCR測(cè)序結(jié)果能證明我的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入成功了嗎？ 3.我這樣的情況會(huì)發(fā)生質(zhì)粒整合嗎？如果會(huì)，是怎樣一個(gè)過(guò)程呢？ 先謝過(guò)！ |
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你可以先提質(zhì)粒再PCR驗(yàn)證，然后酶切驗(yàn)證。出現(xiàn)陽(yáng)性條帶，不一定就是整合了，可能是你引物特異性差導(dǎo)致的。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2019-05-18 15:43:04
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