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YY向前走新蟲 (初入文壇)
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[交流]
微量細(xì)胞提取RNA,trizol保存,如何合并提取
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我有個(gè)問題請(qǐng)教一下提取方面專家: 細(xì)胞數(shù)量是10^4數(shù)量級(jí),每管是500ul左右透明的trizol保存,提取的時(shí)候覺得提取的RNA量達(dá)不到建庫要求(按照每個(gè)細(xì)胞10pg的RNA量算,10^4級(jí)別細(xì)胞含的RNA達(dá)不到1ug建庫起始量),所以將多達(dá)12管合并提取。 提取的時(shí)候我把trizol轉(zhuǎn)管了,用康為試劑盒,加氯仿吸上清加等體積70%乙醇,過柱子提取。檢測(cè)結(jié)果總量達(dá)不到100ng。 請(qǐng)教各位蟲友,哪里做錯(cuò)了嗎? 我知道每一步都有核酸損失,那是不是因?yàn)閾p失的量達(dá)到了2微克,所以提取失敗? 有沒有很好的解決這種問題的方案呢??? |
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