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Hizard-Evn新蟲 (初入文壇)
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[求助]
短片段和平末端載體連接
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我要將我的80bp的回文序列插入到SnabI單酶切的平末端載體上。我是公司合成的80nt的寡核苷酸,自己95℃退火5分鐘之后自然冷卻至室溫形成雙鏈,然后用磷酸激酶處理。將空載單酶切回收后用堿性磷酸酶處理。之后將80bp回文序列和空載10℃連接1小時(shí)做轉(zhuǎn)化?墒菦]有陽性菌落,長出來的全都是空載。想請問各位大佬怎么辦?? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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