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實時定量PCR
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| 什么叫實時定量PCR,有和意義? |
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| 實時熒光定量PCR技術(shù)(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR)是在定性PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的核酸定量技術(shù)。實時熒光定量PCR是目前確定樣品中DNA(或cDNA)拷貝數(shù)最敏感、最準確的方法。RealTime PCR的基本目標是精確測量和鑒別非常微量的特異性核酸,從而可通過監(jiān)測CT值而實現(xiàn)對原始目標基因的含量定量。實時熒光定量PCR法最大的優(yōu)點是克服了終點PCR法進入平臺期或叫飽和期后定量的較大誤差,實現(xiàn)DNA/RNA的精確定量。該技術(shù)不僅實現(xiàn)了對DNA/RNA模板的定量,而且具有靈敏度和特異性高、能實現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點,該技術(shù)在醫(yī)學臨床檢驗及臨床醫(yī)學研究方面有著重要的意義。PCR熒光定量試驗主要采用SYBR Green染料法和Taqman探針法,最近我們正在嘗試用BIOG技術(shù)把RNA逆轉(zhuǎn)錄CDNA,一步完成熒光定量PCR實驗 |
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