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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 綜合其他 » 細胞rna提取
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[交流]
細胞rna提取
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| 病毒誘導細胞凋亡后，要做凋亡基因的表達，想請教在提取細胞RNA時是直接加Trizol，還是要倒掉細胞液后再加Trizol呢？倒掉細胞液的話，那漂浮的凋亡細胞不是也被棄掉了，不會影響提取的RNA的量嗎？ |
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小冀-: 金幣-10, 屏蔽內容, 違規(guī)存檔, 禁止邊緣性廣告，已有多條違規(guī)記錄，請不要出現(xiàn)商品推銷信息或聯(lián)系方式 2019-04-25 17:23:25
小冀-: 金幣-10, 屏蔽內容, 違規(guī)存檔, 禁止邊緣性廣告，已有多條違規(guī)記錄，請不要出現(xiàn)商品推銷信息或聯(lián)系方式 2019-04-25 17:23:25
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3樓2019-04-24 17:10:27
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
| 如果是冷凍的需要完全解凍之后再加Trizol，通常Trizol和血清的比例是1:1，也可以稍多加一些Trizol，少加些血�；靹蛑蠓胖�10分鐘左右，直接加三氯甲烷混勻再去離心，可以不用先離心去沉淀之后再加三氯甲烷。我們實驗室用BIOG CFRNA EASY KIT離心技術提取RNA比Trizol要簡便些,樓主需要注意如果用Trizol每個步驟操作要快，用的時間藥短些，防止RNA降解,異丙醇沉淀的時候，放-20°C的冰箱半個小時，或再適當延長一點時間。迅速離心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易損失部分RNA。不要過分干燥，管內稍有點殘余的乙醇也沒關系。干燥一會就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反轉錄成cDNA再保存。 |
8樓2019-10-09 11:30:09
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