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王文潔新蟲 (初入文壇)
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[求助]
大腸桿菌 場發(fā)射掃描電鏡
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各位大師們好，我最近做掃描電鏡，老發(fā)現(xiàn)未處理的菌比處理的菌還要凹陷，有孔洞，我的具體做法如下： 處理后的菌懸液（未處理菌液在0.85%NaCl溶液里）——6000r/min 4℃ 2min 離心，棄上清——加入預(yù)冷（4℃）2.5%戊二醛，4℃冰箱固定4h——2700g 4℃ 10min離心，棄上清——Pbs洗滌樣品3次——2700g 4℃ 10min離心，棄上清——10% 30% 50% 70% 80% 90%乙醇逐級脫水1次（吹打混勻靜置10min）——2700g 4℃ 10min離心，棄上清——100%乙醇脫水2次（吹打混勻靜置10min）——2700g 4℃ 10min離心，棄上清——乙酸異戊酯置換乙醇2次（吹打混勻靜置10min）——2700g 25℃ 10min離心，棄上清，最后一次勿將液體全部倒掉，留微量——混勻，滴在硅片——自然晾干，然后在40℃烘箱放30 min,最后在培養(yǎng)皿墊張濾紙，在培養(yǎng)皿里（蓋蓋）在干燥器里過夜存放——第二天噴金120s——電鏡觀察。 Pbs緩沖液（0.1mol/L,pH7.2），戊二醛是用pbs配的。 謝謝各位，真的好奇怪。@天使托 |
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gangbadiez
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2樓2021-12-12 18:38:16
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