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求助競爭ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)問題
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棋盤法篩選包被抗原與抗體濃度: 抗體 抗體1 抗體2 抗體濃度ng/ml: 5000 2500 1250 625 312.5 0 0 5000 2500 1250 625 312.5 抗原包被濃度ng/ml : A 1500 1.2490 0.9270 0.7119 0.4979 0.3638 0.0603 0.0614 1.6973 1.6190 1.5685 1.4727 1.3255 B 750 0.9004 0.6490 0.4510 0.3294 0.2214 0.0512 0.0520 1.4440 1.2786 1.1069 1.0092 0.8573 C 375 0.6349 0.4619 0.3164 0.2170 0.1421 0.0498 0.0526 1.2424 1.0480 0.8511 0.7015 0.5870 D 187.5 0.4084 0.2860 0.2042 0.1382 0.0987 0.0491 0.0487 1.0531 0.8513 0.6343 0.4996 0.4174 E 93.75 0.2685 0.2053 0.1422 0.1062 0.0796 0.0470 0.0472 0.8587 0.6394 0.5098 0.2940 0.2881 F 46.875 0.1676 0.1257 0.0980 0.0777 0.0612 0.0503 0.0474 0.6496 0.4700 0.3328 0.2272 0.1950 G 23.4375 0.1211 0.0869 0.0693 0.0620 0.0551 0.0485 0.0500 0.4979 0.3650 0.2402 0.1671 0.1356 H 0 0.0850 0.0659 0.0624 0.0562 0.0599 0.0534 0.0552 0.3772 0.2554 0.1585 0.1113 0.0953 (兩個(gè)抗體,分別對(duì)應(yīng)6列;抗體濃度5000ng/ml,2x稀釋;抗原濃度1500ng/ml,2x梯度稀釋) 之后摸索與抗體1共孵育的濃度范圍: 包被抗原濃度ng/ml : 200 200 200 500 500 500 buffer buffer buffer 100 100 100 抗體1濃度ng/ml: 600 300 100 600 300 100 600 300 100 600 300 100 共孵育抗原: 500ng/ml;2X梯度稀釋 A 0.2595 0.1886 0.1044 0.4378 0.2897 0.1492 0.0771 0.0779 0.0715 0.1572 0.1501 0.1547 B 0.2642 0.1653 0.1134 0.4349 0.3247 0.1572 0.0878 0.0641 0.0751 0.1595 0.1352 0.1113 C 0.2605 0.1673 0.1000 0.4426 0.2978 0.1618 0.0630 0.0670 0.0583 0.1544 0.1154 0.1036 D 0.2611 0.1762 0.1062 0.4621 0.3324 0.1682 0.0613 0.0552 0.0552 0.1759 0.1310 0.1034 E 0.2602 0.1798 0.1031 0.4802 0.3224 0.1654 0.0713 0.0543 0.0653 0.1661 0.1385 0.0975 F 0.2507 0.1826 0.1158 0.5090 0.3679 0.1510 0.0617 0.0644 0.0643 0.1779 0.1550 0.1078 G 0.2770 0.1923 0.1127 0.5092 0.3398 0.2012 0.0708 0.0604 0.0657 0.1866 0.1594 0.1166 H 0.2762 0.1898 0.1437 0.5960 0.3645 0.1831 0.0725 0.0738 0.0756 0.1800 0.1431 0.1078 結(jié)果如上表,沒有什么梯度,只有包被500ng/ml略有梯度,有沒有大神給分析分析? |
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