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Misterboy鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
電泳拖尾 已有2人參與
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| 用MixTaq酶PCR,跑電泳沒問題,有目標(biāo)產(chǎn)物,用高保真酶PCR后,50uL全部電泳,準(zhǔn)備膠回收純化DNA,可是電泳完了,產(chǎn)物嚴(yán)重拖尾,沒有清晰的目的條帶,請問這是怎么回事?請求大神解答@飛約瘋?cè)嗽?/u>@biostar2009@wizardfan@youlinglyw |
鐵蟲 (正式寫手)
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給樓主一些建議吧,不敢說一定能解決問題。1.更換電泳液 2.調(diào)整PCR體系,高保真酶模板加多了可能出現(xiàn)類似情況 3.可以考慮提高一下退火溫度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (正式寫手)
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謝謝答復(fù),電泳前已經(jīng)更換了TAE,退火溫度已經(jīng)65度了,現(xiàn)在換了一種高保真酶在做,希望能做出來吧 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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樓主用的是哪家的高保真酶,退火溫度好高啊,我用takara的高保真酶,一般是55度,最高56,57度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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